应用简介

急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMl)严重危害着 人类的健康,成为主要死亡原因之一目前,人们公认的对AMl 效的 方法是冠状动脉再灌注，但也伴随着再灌注损伤的问题。对于心肌缺血再灌注损伤的研究成为了 的热点问题之一。

心肌缺血再灌注模型

大鼠心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia-reperfusioninjury,MIRI)造模后大鼠的成活率及造模成功率是制约模拟临床心血管、药理药效等方面研究的关键因素之一，但构建--套标准的、可持续操作的心肌缺血模型的制约因素却有很多。快速操作法和常规开胸法是MIRI造模的两种常用方法,但存在开胸时间短对实验操作技术要求高、术中出血、气胸等因素导致模型成功率低下因此,本研究对MIRI造模进行改良.优化,并与这两种常用的方法进行比较,从模型构建成功率大鼠存活率和心肌缺血损伤等方面探讨改良式造模操作的可行性。

大鼠心肌缺血再灌注损伤模型构建步骤

一、术前准备

1. 实验动物选择

   • SPF级雄性SD大鼠，8-10周龄，体重280-300g，适应性喂养1周。
   • 麻醉：3%戊巴比妥钠（1.5mL/kg）腹腔注射，待角膜反射消失后固定于手术台。

2. 术野准备

   • 颈部及胸前区脱毛，碘伏消毒3次；铺无菌手术巾，暴露操作区域。

二、手术操作流程

1. 气管插管与呼吸支持

   • 颈部正中切口（长约1cm），钝性分离气管；用显微剪刀剪开气管（切口不宜过大），插入气管插管连接呼吸机（呼吸频率90次/min，吸呼比1:2，潮气量11mL/kg），生理盐水棉球覆盖切口保湿。

2. 开胸与冠状动脉暴露

   • 于第3、4肋间（可触及心脏搏动最明显处）做皮肤切口（长约1cm），分离皮下组织；可见一条肋间小静脉，用止血钳夹闭两端10秒后剪断。
   • 用显微剪刀在肋间做0.5cm小口，插入2个撑开器左右对称撑开肋骨，暴露心脏。

3. 冠状动脉结扎与再灌注

   • 止血钳轻夹心包膜并剪开，暴露左心室；用持针器（5-0缝合线）在左心耳下方3mm处进针，深度约1mm，宽度约2mm，穿透心肌表层后在上方放置一根直径0.53mm、长5cm的丝线作为结扎参照物，打结固定。
   • 缺血阶段：结扎冠状动脉30分钟（可见左心室前壁变苍白）；再灌注阶段：轻轻抽除结扎线，观察心肌颜色恢复（变红润）。

三、术后处理

1. 关胸与抗感染

   • 逐层缝合肋间肌及皮肤，关闭胸腔；术后立即给予青霉素80万单位（0.5mL/只）腹腔注射预防感染。

2. 样本采集

   • 分别于术后24小时和1周处死大鼠，摘取心脏，用于后续病理检测（如TTC染色、HE染色）或分子生物学分析。